Repositori BKPKPengembangan Vaksin Dengue Tetravalen Sub Unit Protein Rekombinan prM/E Strain Indonesia, Tahun ke-2 (TH 2016)WhinieLestariauthorPrettyMultihartinaauthorRitaMarletaauthorMasri SembiringMahaauthorVirus Dengue (DENV) sampai saat ini masih menjadi masalah kesehatan masyarakat di dunia dan menjadi salah satu prioritas program kesehatan di Indonesia. Vaksinasi merupakan salah satu alternatif potensial dalam pencegahan infeksi dengue. DENV adalah penyebab DF (Dengue fever), DHF (Dengue haemorrhagic fever) dan DSS (Dengue shock syndrom) yang merupakan kolaborasi ke 4 serotipe (DENV-1,-2,-3,-4). Keempat serotipe tersebut beredar di Indonesia dengan genotipe yang berbeda dengan negara lain. Epitope predominan yang berperan penting dalam patogenesis adalah protein struktural (protein prM-E) dan protein nonstruktural (NS1 dan NS3). Protein prM dan E dapat menginduksi respon imun humoral dan selular sehingga protein tersebut yang akan dieksplorasi sebagai bahan imunogen untuk kandidat vaksin. Selanjutnya sesuai dengan tindak lanjut pertemuan konsorsium vaksin dengue dengan pihak industri (PT Biofarma), sejak tahun 2015 telah disepakati perubahan roadmap untuk keseragaman jenis vaksin dan metode pengembangannya. Jenis vaksin yang akan dikembangkan seragam di konsorsium hanya vaksin dengue subunit protein rekombinan prM/E tetravalen (DENV-1,-2,-3,-4) strain Indonesia dengan sistem produksi yang halal (porcine free). Metode untuk konstruksi dan produksi protein rekombinan dilakukan dengan 2 metode yaitu metode yang sudah dikembangkan di institusi masing-masing dan metode yang dikembangkan di Bio Farma di sistem ekspresi Pichia pastoris. Hasil penelitian tahun 2016, telah diperoleh isolat DENV-1,-2,-3,-4 strain kandidat vaksin dan karakterisasi genetik virus dengue isolat Indonesia (Balitbangkes dan Eijkman). Untuk kandidat vaksin subunit protein rekombinan, telah diperoleh plasmid rekombinan prM/E DENV-1 genotipe I dan IV, prM/E DENV-2, DENV-3 dan DENV-4 yang telah diverifikasi dengan metode digesti, PCR dan sekuensing. Kemudian telah diperoleh juga hasil transformasi plasmid rekombinan ke sel inang yeast P. pastoris menjadi P. pastoris rekombinan prM/E DENV-1,-2,-3,-4 yang telah diverifikasi dengan metode PCR. Untuk P. pastoris rekombinan prM/E DENV-1 dan DENV-4 telah diverifikasi juga dengan metode sekuensing yang menunjukkan hasil gen pengkode protein rekombinan memiliki homologi (similaritas 100%) dengan sekuen protein aslinya dari wild type virus dengue strain Indonesia. Selanjutnya telah diperoleh juga protein rekombinan prM/E DENV-1 dan DENV-4 yang telah diverifikasi dengan metode SDS PAGE berukuran sekitar 56 kDa dan Western Blot yang menunjukkan bahwa protein rekombinan tersebut dapat mengenali antibody preMembran dengue dan antibody prM/E DENV-1,-2,-3,-4 dan tetravalent. Kata kunci: Dengue, vaksin, protein rekombinan, tetravalen, strain IndonesiaRM Therapeutics. Pharmacology2016-12Experiment

For work being deposited by its own author: In self-archiving this collection of files and associated bibliographic metadata, I grant Repositori BKPK the right to store them and to make them permanently available publicly for free on-line. I declare that this material is my own intellectual property and I understand that Repositori BKPK does not assume any responsibility if there is any breach of copyright in distributing these files or metadata. (All authors are urged to prominently assert their copyright on the title page of their work.)

For work being deposited by someone other than its author: I hereby declare that the collection of files and associated bibliographic metadata that I am archiving at Repositori BKPK is in the public domain. If this is not the case, I accept full responsibility for any breach of copyright that distributing these files or metadata may entail.

Clicking on the Deposit Item Now button indicates your agreement to these terms.